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         AMES TEST PER
          MUTAGENICITA’
 
            KIT PER
            CITOTOSSICITA’

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        AMES TEST viene utilizzato per verificare la capacità delle
        sostanze chimiche di indurre mutazioni genetiche.

        La capacità di provocare mutazioni è spesso associata alla
        capacità di provocare cancro: per questo l'AMES TEST
        costituisce un metodo valido di screening per valutare la
        cancerogenicità di un agente valutandone la mutagenicità,
        in modo  particolare nell’ ambito biomedico e farmaceutico-
        industriale nella  fase di sperimentazione di nuove molecole
        e per le analisi ambientali.
  
        Il principio del test si basa sulla valutazione della capacità di
        un sospetto mutageno di provocare la reversione di un carattere
        auxotrofo his- in un ceppo di batteri mutato (Salmonella
        typhimurium), rendendolo nuovamente capace di sopravvivere
        in un terreno privo di istidina.
   
        Ames test classico viene effettuato piastrando i batteri su un
        terreno solido di agar contenente una minima quantità di istidina
        e ponendo al centro della piastra un disco contenente la sostanza
        in esame, che poi si diffonde nel terreno. La presenza delle tracce
        di amminoacido nel terreno permette di individuare mutazioni che,
        per manifestarsi fenotipicamente, richiedono più cicli di  duplicazio-
        ne cellulare.
    
        La frequenza delle  mutazioni ottenute viene valutata in base
        alla distanza dell'alone di "non crescita" dal disco dopo 48 ore
        di incubazione, in rapporto ad  una piastra di mutazioni.

        Anche se fino a poco tempo fa l’Ames test classico è stato
        considerato il test più sicuro e più  comunemente usato al
        mondo, con l’enorme aumento del numero di sostanze che
        necessitano questo  tipo di test, la sua applicazione ai fini di
        screening è diventata poco pratica per i seguenti motivi:
     
         -   troppo laboriosa
           richiede troppa sostanza posta sotto il test
         -   richiede troppo tempo. 

       AMES TEST PER MUTAGENICITA’, prodotto da Xenometrix e
       distribuito dalla Biologik, è una  modifica del classico Ames test
       in formato di piastra microtiter ed in un terreno liquido che
       presenta una validissima alternativa, in quanto, pur rimanendo
       fedele ai principi di Ames test classico, offre numerosi vantaggi,
       quali:
  
         -    più veloce
         -    ceppi batterici controllati e con caratteristiche certe
             
(nessuna necessità dell’analisi di genotipo)
         -   colorimetrico (più chiara interpretazione)
         -   in formato  piastra microtiter (meno laborioso, più facile
             e pratico)
         -   più economico (richiede 6 volte meno la quantità della
             plasticheria)

       stesso campione di cellule. Questa ottimizzazione della
       tecnica end-point multiparametrica diminuisce notevolmente
       sia il consumo del campione che la manualità stessa.
  

       Inoltre, elimina la potenziale variabilità fra i test eseguiti
       separatamente, causati dalla necessità per il maggior numero
       di passaggi, tempi di semina, densità e qualità cellulari variabili
       con i tempi di attesa. Quindi, le differenze dei valori di IC50 fra i
       test riflettono in modo più accurato la reattività delle cellule verso
       le sostanze potenzialmente tossiche.

       L’utilizzo dei Kit per citotossicità multiparametrici aumenta
       notevolmente la possibilità di scoprire anche lesostanze
       tossiche che non sarebbero state rivelate come tali nel caso
       del test monoparametro. Inoltre, questi kit sono particolarmente
       utili per i testing dei campioni preziosi, come per esempio le cellule
       primarie.

          necessita di una minore quantità di sostanza da testare (3 volte
            meno del sistema tradizionale)
          possibilità di automatizzazione (centinaia di sostanze possono
            essere testate contemporaneamente)
        -   tutto l’occorrente e già pronto all’uso ed è  fornito nel kit
            (nessuna necessità per  la preparazione dei terreni o del
            controllo della loro sterilità e fertilità)
        -   supporto tecnico incluso nel prezzo.
        -   richiede il 50% in meno di fegato di ratto S9 rispetto al sistema
            tradizionale.



                         BREVE DESCRIZIONE DEL PROCEDIMENTO

       division 3
       



     Biologik offre una serie di Kit pronti all’uso per la ricerca
     qualitativa della citotossicità nelle cellule eucariotiche.

     Viene offerta la possibilità di testare vari parametri,
     mediante: XTT, MTT, Lactate Dehydrogenase (LDH),
     Sulforhodamine B (SRB), Neutral Rosso (NR), Crystal
     Violetto (CVDE), AcidPhosphatase (PA) e Glucosio
     (GLU).

     Questi parametri permettono la valutazione dell’ attività
     della catena respiratoria, dell’integrità di membrana,
     della sintesi proteica totale, dell’attività lisosomiale,
     del contenuto del DNA in rapporto al numero di cellule
     e dell’attività  metabolica.

     I Kit per lo screening della citotossicità permettono di
     determinare fino a quattro parametri metabolici sullo
     stesso campione di cellule. Questa ottimizzazione della
     tecnica end-point multiparametrica diminuisce notevol-
     mente sia il consumo del campione che la manualità
     tessa.

     Inoltre, elimina la potenziale variabilità fra i test eseguiti
     separatamente, causati dalla necessità per il maggior
     numero di passaggi, tempi di semina, densità e qualità
     cellulari variabili con i tempi di attesa.

     Quindi, le differenze dei valori di IC50 fra i test riflettono
     in modo più accurato la reattività delle cellule verso le
     sostanze potenzialmente tossiche.

     L’utilizzo dei Kit per citotossicità multiparametrici aumenta
     notevolment e la possibilità di scoprire anche le sostanze
     tossiche che non sarebbero state rivelate come tali nel
     caso del test monoparametro. Inoltre, questi kit sono
     particolarmente utili per i testing dei campioni preziosi,
     come per esempio le cellule primarie.


      
       Dietro richiesta saremo lieti di inviarVi maggiori informazioni riguardanti sia il nostro AMES II  MUTAGENECITYASSAY che altri
       KIT PER LA  CITOTOSSICITA’.
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